Identificazione dei mastociti nel liquido di lavaggio broncoalveolare (BAL) del cavallo per la diagnosi della malattia infiammatoria delle vie aeree distali (SAID)

La malattia infiammatoria delle vie aeree distali (SAID) è una patologiarespiratoria a sfondo allergico causa di scarso rendimento nei cavalli da corsa,identificabile con lo stadio iniziale della bronchite cronica ostruttiva (COPD). Unvalido ausilio diagnostico, in particolare nelle forme subcliniche, risulta esserel’esame citologico del liquido di lavaggio broncoalveolare (BAL). Tuttavia, gravidifficoltà sorgono nel riconoscimento delle forme di SAID caratterizzateunicamente da aumento del numero dei mastociti, data l’incapacità dellenormali colorazioni di routine di svelare la presenza di tali cellule. Scopo diquesto studio è stata la ricerca di una colorazione idonea per l'evidenziazionedei mastociti nel BAL equino, che associasse alla facilità e rapidità diesecuzione un'alta specificità nell'identificazione di tali cellule attraverso ilfenomeno della metacromasia.Il lavaggio broncoalveolare è stato eseguito su 10 cavalli da sella e 1 pony, dietà compresa tra i 6 e i 20 anni. Dopo centrifugazione ed eliminazione delsurnatante, il materiale è stato strisciato ed asciugato all’aria. Di ogni campionesono stati preparati due vetrini, colorati rispettivamente con una colorazioneWright-Giemsa modificata (Diff Quik) e con diversi protocolli di blu di toluidinadescritti in letteratura umana e veterinaria. Nei vetrini colorati con Diff Quik èstata eseguita la conta cellulare differenziale ad un ingrandimento di 400x su untotale di 200 leucociti e la valutazione della popolazione cellulare presente e di materiale non cellulare. Nei vetrini colorati con blu di toluidina è stata eseguitala conta dei mastociti su un totale di 200 cellule.In 5 casi la colorazione con il blu di toluidina risultata più idonea ha confermatola diagnosi citologica di SAID e COPD effettuata attraverso l’osservazione deivetrini colorati con Diff Quik e in 2 casi il quadro citologico è risultato normaleapplicando entrambe le colorazioni. I risultati più interessanti sono emersi in 4casi in cui è stato possibile diagnosticare la forma di SAID con mastocitosiunicamente attraverso l’osservazione dell’incremento delle cellulemetacromatiche (media : 6.75%; valore normale : < 2%) nel vetrino colorato conil blu di toluidina, a fronte di un quadro citologico perfettamente normale nelvetrino colorato con Diff Quik. I risultati del presente studio hanno evidenziatol'importanza dell'utilizzazione del blu di toluidina nella ricerca dei mastociti insoggetti con forme asintomatiche di SAID, non altrimenti svelate dalle comunicolorazioni citologiche. Il protocollo adottato si è dimostrato particolarmentevalido nell’evidenziazione della metacromasia mastocitaria e di rapida edagevole esecuzione, consone all’immediatezza dell’analisi citologica.[...]